
项目介绍
酶联免疫吸附法(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, ELISA)是一种广泛应用于生物医学和临床诊断的免疫学检测方法,用于定量或定性分析样本中抗原或抗体的存在与浓度。该方法结合了免疫学原理和酶学反应,通过抗原与特异性抗体之间的结合,以及酶催化反应的可视化,来实现对目标分子的检测。
主要原理:
ELISA基于抗原-抗体特异性结合的原理,通过抗原或抗体固定在固相载体(如96孔板)上,使用标记了酶的二抗进行反应。酶催化底物转化产生显色反应,反应的强度与样本中目标分子的浓度成正比。常用的酶包括辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(ALP)。
ELISA检测具有高灵敏度、特异性强、操作简便和高通量的特点,广泛应用于临床诊断(如HIV、乙肝、COVID-19等病毒检测)、食品安全检测、环境监测以及基础研究中。
功能介绍
ELISA平台具有高灵敏度、特异性强、操作简便和高通量的特点,广泛应用于临床诊断(如HIV、乙肝、COVID-19等病毒检测)、食品安全检测、环境监测以及基础研究中。
主要应用:
疾病诊断:广泛应用于病毒、细菌感染、免疫性疾病、肿瘤标志物等的检测。
食品安全:用于检测食品中的过敏源、污染物或添加剂。
药物监测:用于检测体内药物或其代谢产物的浓度。
疫苗研究:用于检测疫苗接种后的抗体反应。
总之,ELISA平台因其准确、灵敏、可扩展等优点,已成为生命科学和医学领域中不可或缺的常规检测手段。
项目案例
样品要求
酶联免疫吸附法(ELISA)在进行检测时,对于样品的要求相对严格,以确保检测结果的准确性和可靠性。样品要求如下:
1. 样品类型
血清/血浆:血清和血浆是最常用的样品类型,适用于检测抗体或抗原。血清通常需要通过离心去除血细胞。
尿液:适用于检测尿液中的抗原或抗体,通常用于监测某些病原或药物。
细胞培养上清液:用于检测细胞分泌的蛋白质或细胞因子。
组织提取物:用于检测从组织样本中提取的抗原或抗体。
其他体液:如唾液、胸水等,具体根据检测的目标决定。
2. 样品质量
新鲜度:样品应尽量新鲜采集,尤其是血清和血浆,应避免长时间保存。若无法立即检测,应根据需要进行适当冷冻。
避免溶血:样品中的溶血现象会影响实验结果,因此采集过程中应小心,避免血样被过度搅拌或遭受剧烈震动。
无污染:样品应避免受到外部物质的污染,如化学试剂、细菌或其他杂质。
3. 样品保存
温度控制:大多数生物样品需要在低温条件下保存。血清和血浆样品通常需要在-20°C或更低温度下保存,以防止蛋白质降解。
防止冻融反复:反复冻融会破坏样品中的蛋白质,因此样品应在使用前进行单次分装,避免重复冻融。
4. 样品稀释
根据样品中目标物质的浓度,可能需要进行适当稀释。在稀释时,使用合适的缓冲液,避免因pH变化或离子强度不合适导致蛋白质变性或失活。
5. 体积要求
样品体积:每个ELISA反应孔需要的样品体积通常较小,一般为50-100μL。在进行多个样品的高通量检测时,应确保提供足够的样品量。
6. 去除干扰物
去除高浓度的杂质:如样品中存在较高浓度的脂质、盐类、酶抑制剂等,可能会干扰ELISA的准确性。在实验前需要通过适当的方法去除这些杂质。
确保样品符合上述要求,能够提高ELISA的准确性和灵敏度,减少假阳性或假阴性结果的出现。







