
项目介绍
HE染色(Hematoxylin and Eosin Staining)是一种常用的组织学染色方法,广泛应用于临床病理学和生物学研究中,用于观察组织切片的形态结构。该方法通过使用两种不同的染色剂——伊红(Eosin)和苏木精(Hematoxylin),使组织中的细胞结构和成分能够被有效区分和显现,便于显微镜下观察。
1. 染色原理
苏木精(Hematoxylin):苏木精是一种带有负电荷的染料,能够与细胞核中的DNA结合,使细胞核呈现深蓝色或紫色。这是因为DNA含有大量的磷酸基团,与带正电荷的苏木精染料相互作用。
伊红(Eosin):伊红是一种酸性染料,能够与细胞质中的蛋白质、胶原纤维等带有正电荷的结构结合,使细胞质呈现粉红色或红色。伊红可以突出显示细胞质和其他组织成分的形态。
2. 染色步骤
HE染色的过程一般包括以下几个步骤:
切片:将组织样本固定(常用福尔马林固定),然后进行石蜡包埋,最后切成薄片。
脱蜡与水化:将组织切片从石蜡中去除,并通过梯度酒精进行水化,使切片适合染色。
染色:
先用苏木精染色,通常染色时间为几分钟,之后进行洗涤。
然后用伊红染色,染色时间较短,通常为几十秒到1分钟。
脱水与封片:经过染色后的切片需要通过梯度酒精进行脱水,最后用透明剂如二甲苯进行透明处理,再覆盖封片胶封片,便于显微镜观察。
功能介绍
HE染色由于其简便且直观的特点,在组织学研究中被广泛应用,主要用于:
组织形态观察:例如观察细胞核、细胞质及组织结构的形态学变化。
疾病诊断:HE染色是临床病理检查中最常用的染色方法之一,尤其在癌症、炎症、结缔组织病等疾病的组织学诊断中具有重要作用。
细胞学研究:研究细胞内的结构和分布,尤其是细胞核与细胞质之间的关系。
总的来说,HE染色是一种重要且基础的组织学染色技术,在生物医学研究及临床病理学中具有重要的应用价值。
项目案例
样品要求
HE染色的样品要求主要涉及组织样本的采集、固定、处理以及切片等步骤。为了保证染色效果和组织形态的完整性,样品需要满足以下几个基本要求:
1. 样品采集
新鲜性:样品应该尽量新鲜,采集后要及时处理。长时间暴露在空气中会导致组织变质,影响后续染色效果。
大小适中:样品应根据切片机的要求适当取材,通常样品体积不宜过大,以便能够均匀处理和切片。
2. 固定要求
固定剂:常用的固定剂是10%中性福尔马林,它能够有效固定组织中的蛋白质,防止组织腐败和结构变化。固定液的量应为样品体积的10倍以上。
固定时间:样品应在固定剂中浸泡足够时间,通常需要4至24小时,过短时间的固定可能会导致样品无法完全固定,影响染色效果;过长时间则可能导致组织变硬、无法切片。
3. 组织类型
不同类型的组织在HE染色中可能会有不同的表现,某些组织如脂肪、骨组织等可能因其独特的组织结构需要特殊的处理方法。
对于较为硬的组织,如骨组织或硬化组织,可能需要特殊的脱钙处理,确保能够顺利切片。
总结来说,HE染色的样品要求包括采样后的及时固定、正确的脱水和透明处理、合适的切片厚度以及组织结构的完整性。满足这些要求可以确保HE染色结果清晰、准确,便于组织学和病理学分析。







