项目介绍
蛋白互作分析（Co-IP，免疫共沉淀，Pull-down）是一种广泛应用于研究蛋白质间相互作用的实验技术。这些方法能够揭示细胞内蛋白质之间如何通过直接或间接的物理相互作用来形成蛋白复合物，以及这些相互作用如何影响细胞的生物学功能和信号传导。
Co-IP（免疫共沉淀）
Co-IP是一种利用特异性抗体将目标蛋白从细胞裂解液中捕获并沉淀下来，同时共同沉淀的蛋白质则代表与目标蛋白相互作用的伙伴。具体步骤包括：
1.使用特异性抗体与目标蛋白结合，形成免疫复合物。
2.通过离心或其他方法将免疫复合物从细胞裂解液中分离出来。
3.然后通过Western Blot等技术检测沉淀物中的共沉淀蛋白，从而分析目标蛋白的相互作用伙伴。
Co-IP常用于确认蛋白质间的直接相互作用，以及探究蛋白质复合物的组成。它的优势在于能够在接近生理条件下保留蛋白质之间的相互作用，适用于体内或体外的蛋白质互作研究。
2. Pull-down（拉下实验）
Pull-down实验与Co-IP类似，但它通过将目标蛋白或其标签融合蛋白（如GST、His等）附着在固相支持物（如磁珠或琼脂糖珠）上，利用这些珠子来拉下目标蛋白及其互作伙伴。其基本步骤包括：
1.将目标蛋白（或带标签的蛋白）固定在固相支持物上。
2.与细胞裂解液中的其他蛋白质混合，目标蛋白的互作伙伴会与其结合。
3.通过离心或磁场等方式将复合物从溶液中分离出来。
4.使用Western Blot或质谱分析等方法，检测与目标蛋白互作的其他蛋白。
Pull-down实验的优势在于它通过标签蛋白进行富集，使得对低丰度或难以检测的蛋白互作的分析变得更加简便和高效。
功能介绍
1.细胞信号转导：Co-IP和Pull-down广泛应用于研究细胞信号通路中的蛋白质相互作用，如MAPK、PI3K/Akt等通路中的关键蛋白之间的相互作用。
2.蛋白质复合物分析：通过这些技术，研究人员可以识别和分析大型多蛋白复合物，探索它们在细胞中的功能。
3.疾病机制研究：蛋白互作分析对于揭示与疾病相关的蛋白质网络至关重要。例如，癌症、神经退行性疾病等常常涉及特定蛋白质的异常相互作用。
4.药物靶点发现：通过揭示病理状态下蛋白质间的异常互作，研究人员可以为新药开发提供潜在靶点。
总的来说，蛋白互作分析（Co-IP与Pull-down）是揭示细胞内蛋白质互作网络、研究细胞功能调控和疾病机制的重要工具。
项目案例
样品要求
同蛋白印记实验（western blot）
